任选一配方，先把木屑与麸皮等拌均，把石膏、蔗糖溶于水后再拌入料中，料、水比例大约为1：1.5左右，料的含水量在65%。在栽培过程中，如果培养基含水量偏低，子实体生长后期，由于水分供应不足，会影响孢子的继续分化，造成孢子减产，所以要特别注意培养基的含水量。装料时，要松紧合适，一般750毫升菌种瓶，可以装湿料0.5千克左右，培养料宜装到瓶口齐肩处，培养料装得离瓶口近，可以减少菌种老皮的形成，也减少子实体畸形的发生几率。装好料后，用木棒打孔，然后塑料膜或棉塞封口，接种时将菌种接入培养料中间即可。广口瓶注意装得松紧适度，装至距口2厘米上部，将瓶在木屑堆上震动几下，再继续装料压平，使料压到瓶肩处，要稍加压紧。用直径10~15毫米的木棍或玻璃棒将瓶内料中央扎一深孔，然后用双层高压聚乙烯膜密封。
与袋栽灵芝料袋灭菌基本相同。注意在装锅时，装量不宜过满，要留有余地，瓶间应有间隙，可选用常压或高压灭菌方法。
采用常压灭菌锅内温度可达105℃，灭菌8小时。如果用高压蒸汽灭菌锅，应在放冷气后，在1.5千克/厘米2压力下，保持1.5小时。停火后锅内冷却到25℃左右时即可出锅。出锅时应尽量保持清洁，迅速运往无菌室接种。在无菌条件下进行接种。接种方法与袋栽相同。一般750毫升瓶的菌种可接80瓶。接种时注意要用接种工具将菌种轻轻压一下，使之与培养料充分接触。
